您好!歡迎訪問浙江華才檢測技術有限公司,專業從事第三方公正檢測服務、技術咨詢、行業培訓的企業。
                                                                First slide

                                                                基于核酸分子學方法的肉類成分鑒別技術研究進展

                                                                為保證食物成分的真實性,質檢“十二五”規劃綱要明確指出,需要點加強展開食物摻假辨別技能研討。在肉類摻假方式層出不窮的形式下,對動物源性成分辨別技能的研討逐漸成為食物安全領域的研討熱門。目前,運用的動物物種辨別剖析辦法首要依據蛋白質和DNA剖析。


                                                                慣例PCR-凝膠電泳法

                                                                DNA片段經擴增后,經過瓊脂糖凝膠電泳進行片段巨細的檢測,這是依據核酸分子學肉類成分辨別辦法中應用廣泛且操作最簡單的技能。其根本的實驗思路為:依據不同物種細胞核或線粒體基因組序列中的特征位點規劃物種特異性引物,使用PCR反響完成食物中方針基因片段的指數級擴增,繼而經過電泳辨別食物中可能的物種來歷。


                                                                多重PCR-凝膠電泳法:

                                                                多重PCR是規劃多種一般PCR的引物,加入同一PCR反響系統里,同時擴增出多個核酸片段,以同時檢測多種不同動物源成分的一項具有發展前景的技能。比較于單一物種的PCR系統,多重PCR技能具有節約本錢,提高剖析速率、功率和牢靠性的優點。


                                                                PCR-RAPD法和PCR-RFLP法:

                                                                PCR-限制性內切酶片段長度多態性(RFLP)法是將通用引物擴增后的PCR產品進行限制性內切酶酶切,然后經過凝膠電泳進行觀察,作為單一物種的特有形式進行定性剖析,可進行親緣性較近的物種間的辨別。

                                                                PCR-隨機擴增多態性DNA(RAPD)使用任意PCR短的引物擴增產生一系列的產品,得到PCR產品的指紋圖譜,依據指紋圖間的不同區別不同的種屬。當參考材料可用的很少或DNA序列信息未知時,RAPD技能是十分強壯的。但PCR-RAPD的重復性較差且受到食物中其他DNA成分的嚴峻攪擾,存在不易規范化與廣泛應用的缺點。


                                                                DNA條形碼:

                                                                DNA條形碼技能開始用于生物分類和物種辨別,后發展到應用于動物肉類判定中并得到廣泛研討,是一種簡單、快速、牢靠、有效的分子判定技能。大多數動物物種的DNA條形碼是線粒體上一段約650 bp編碼基因COI,研討者將其作為動物判定的條形碼規范片段。COI基因在雙鏈環狀閉合的核外線粒體基因組上,保證了其相對完整性和熱穩定性,在深加工的肉類食物中有相對滿足量的DNA被用于PCR擴增,保證滿足高的PCR產品含量。COI序列還具有滿足變異性、易擴增、片段自身在物種種內具有特異性和種間多樣性等特點。


                                                                實時熒光定量PCR技能:

                                                                實時熒光定量PCR技能是使用熒光分子供給的熒光強度與PCR產品的豐度之間的相關性來完成實時數據收集。比較于在末期進行剖析的凝膠瓊脂糖或聚丙烯酰胺電泳技能,實時熒光定量PCR辦法自然更加精確活絡。在復雜的混合而成的產品中,即使只要微量的不同物種成分,也能剖析出來,因此被認為是在肉類判定中最有前途的分子東西之一。


                                                                ddPCR技能:

                                                                微滴數字(dd)PCR技能作為一種全新的精確定量核酸檢測辦法,經過把反響系統均分到大量反響單元中獨登時進行PCR,并依據泊松散布和陽性比例來計算核酸數量。與傳統PCR、定量PCR比較,其結果的精確度、精確性和活絡度更佳。定量結果不再依賴于Ct值,直接給出靶序列的開始濃度,完成真正意義上的肯定定量。

                                                                在線留言/Message

                                                                欧美婷婷丁香五月社区